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中華人民共和國農業行業標準--硅酸鹽細菌肥料 Silicate bacteria fertilizer

http://www.gfxsecure.com  來源: 類別:行業資訊-行業標準 更新時間:2009-06-27 閱讀

                         中華人民共和國農業行業標準--硅酸鹽細菌肥料
       中華人民共和國農業行業標準          硅酸鹽細菌肥料
    Silicate bacteria fertilizer    
    前 言
    本標準在原有標準NY227-1994《微生物肥料》的基礎上,對其中的硅酸鹽細菌肥料部分進行修改。
    主要修改內容如下:
    —增加術語、抽樣和判定規則部分;在檢驗方法中增加允許差;
    —在技術要求中刪除成品無害化指標。
    本標準自實施之日起,同時代替NY227-1994中的硅酸鹽細菌肥料部分。
    本標準的附錄A、附錄B、附錄C都是標準的附錄。
    本標準由中華人民共和國農業部提出。
    本標準起草單位:農業部微生物肥料質量監督檢驗測試中心、中國農業科學院土壤肥料研究所。
    本標準主要起草人:李慧荃、吳觀以、李元芳、葛誠、沈德龍。
    硅酸鹽細菌肥料
    Silicate bacteria fertilizer
    1 范圍
    本標準規定了硅酸鹽細菌肥料的分類、技術要求、檢驗方法、檢驗規則、包裝、標識、運輸與貯存。
    本標準適用于能釋放鉀、磷與灰分元素,改善作物營養條件的有益微生物發酵制成的活體微生物肥料制品。
    2 引用標準
    下列標準所包含的條文,通過在本標準中引用而構成為本標準的條文。本標準出版時,所示版本均有效。所有標準都會被修訂,使用本標準的各方應探討使用下列標準最新版本的可能性。
    GB/T 1250一1989 極限數值的表示方法和判定方法
    GB/T 6543一1986 瓦愣紙箱
    NY 411一2000 固氮菌肥料
    NY 227一1994 微生物肥料
    3 定義
    本標準采用下列定義:
    3.1 硅酸鹽細菌肥料 在土壤中通過其生命活動,增加植物營養元素的供應量,刺激作物生長,抑制有害微生物活動,有一定的增產效果。
    4 產品分類 按劑型不同分為:液體菌劑、固體菌劑和顆粒菌劑。
    5 技術要求
    5.1 菌種 非致病菌,能在含鉀的長石粉、云母及其他礦石的無氮培養基上生長,菌體內和發酵液中存在鉀及刺激植物生長的激素物質。
    5.1.1 菌種用膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)的一個變種菌株或環狀芽孢桿菌(B. circulans)及其他經過鑒定用于硅酸鹽細菌肥料生產的菌種,嚴格控制各種遺傳工程微生物菌種(GEM)的使用。凡用本標準以外的菌種必須經過鑒定。
    5.1.2 菌體大小為4~7μm×1~1.2μm,長桿狀,兩端鈍圓,胞內常有1~2個大脂肪顆粒,革蘭氏染色呈陰性,有莢膜,有橢圓形芽孢。
    5.1.3 在無氮培養基上生長的菌落粘稠,富有彈性,呈圓形,邊緣整齊、光滑、有光澤,隆起度大,無色透明。
    5.1.4 在牛肉膏蛋白胨培養基上基本不生長。

    5.2 成品技術指標(見表1)
    1) 其中包括10-6馬丁培養基平板上無霉菌。 2) 此項僅在監督部門或仲裁檢驗雙方認為有必要時才檢測。
    6 抽樣
    按每一發酵罐菌液制成的產品為一批,逐批抽樣檢驗。抽樣過程要嚴格避免雜菌污染。
    6.1 抽樣工具及用品 抽樣前預先準備好無菌塑料袋(或塑料瓶)、金屬勺、剪刀、封口機(或封口膠帶)、牛皮紙封樣袋、標簽、抽樣封條和膠水。
    6.2 抽樣數量及抽樣方法 在成品庫抽樣,按“ ”形分層設點抽樣,抽樣以件為單位,小包裝產品以一包裝箱為一件。大包裝(30-50kg)產品以一袋(或一桶)為一件。抽樣基數由樣品基數的大小確定。1-10件,全部抽樣。11-200件,抽樣10件;201-400件,抽取20件。樣品基數大于400件,按照超過部分的2%增加抽樣件數?偧䲠挡怀^40件。
    每件小包裝產品抽取一小袋,在無菌條件下每袋取樣200g。將所有樣品混勻,按四分法縮到2000g,分裝4袋,然后封口。每2袋為一份裝入牛皮紙封樣袋。
    液體產品每件吸取10mL,一同防入無菌的三角瓶中,混勻后分成兩份,每份250mL。凍干產品,每件取一支防入無菌的三角瓶中,加無菌液體培養液,溶解混勻后分成兩份,每份50mL。貼上抽樣標簽和封條(一份被抽樣單位留存,一份交檢測中心檢測)。
    7 檢驗方法
    7.1 儀器設備及試劑
    7.1.1 儀器設備 生物顯微鏡(10×100);
    菌落計數器;
    恒溫培養箱;
    恒溫干燥箱;
    恒溫搖床;
    滅菌鍋;
    無菌室或超凈工作臺;
    酸度計;
    試管:ф15mm×150mm,ф18mm×180mm;
    培養皿:直徑9cm;
    三角瓶:500mL;
    無菌吸管:1、2、5、10mL;
    玻璃刮刀;
    濾紙;
    酒精燈;
    標準篩:孔徑0.18mm和0.15mm;
    1號羊毛畫筆;
    無菌水;
    無離子水。
    7.1.2 試劑(見附錄A)
    7.2 成品檢驗
    7.2.1 氣味檢驗
    取硅酸鹽細菌肥料樣品打開包裝,進行感官檢驗。
    7.2.2 外觀檢驗
    將固體硅酸鹽細菌肥料包裝打開,裝在白色搪瓷盤中,將液體硅酸鹽細菌肥料搖勻,在明亮光線下進行感官檢驗。
    7.2.3 pH值測定
    液體型樣品:用50mL量筒取40mL樣品放入50mL燒杯中,直接在酸度計上測定,取三次測定結果的平均數。
    粉末型、顆粒型樣品:稱取樣品15.0g,放入50mL燒杯中,加入無離子水30mL。通過磁力攪拌使溶液均勻后用酸度計測定pH值。取三次測定結果的平均數。
    7.2.4 含水量測定
    稱取固體硅酸鹽細菌肥料三份,每份20.00g,精確到0.01g,放入已稱恒重的鋁盒中。置105℃干燥箱內烘烤4h,移至干燥器內,冷卻后稱重。
    根據烘干前后質量差按式(l)計算含水量。取三個樣品測定數的平均值。平行樣品絕對偏差應低于1%。
     含水量(%)=(m0-m1)/m0×100 ………………(1)
式中:m0一烘干前樣品質量,g
       m1一烘干后樣品質量,g。
    7.2.5 細度測定
    準確稱取粉末型樣品50.0g,放入300mL燒杯中,加250mL的自來水浸泡5min,將浸泡好的樣品倒入0.18mm的篩上,用自來水沖洗(沖洗時嚴防樣品濺出),在沖洗過程中,用刷子輕輕地刷,直至流下清水為止。將篩子連同篩上樣品放到烘箱中,在105℃下烘4h,冷卻后稱篩上樣品。
    篩上樣品百分數含量按式(2)計算,樣品通過0.18mm孔徑篩子的百分數按式(3)計算:
    篩上樣品(%)=篩余物干重/(1-樣品含水百分數)/樣品質量×100 ………………(2)
    注:篩上樣品的百分數不得大于20%。
    樣品通過0.18mm孔徑篩子的百分數=1-篩上樣品百分數…………(3)
    顆粒樣品通過篩子測量時,不須水浸泡,將孔徑5.0mm和2.5mm兩篩摞在一起,大孔徑在上,一次通過。篩上物須小于10%。
    7.2.6 有效活菌數及雜菌率的測定
    平板計數法,采用選擇培養基(見附錄B),按NY 227-1994中5.2執行。
    7.2.6.1 測定步驟 準確稱取樣品10.0g,加入帶玻璃珠的100mL的無菌水中(液體菌劑取l0mL加入90mL的無菌水中),靜置20min后在旋轉式搖床上200r/min充分振蕩30min,即成母液的菌懸液。
    系列稀釋:用無菌吸管分別吸取5mL上述母液的菌懸液加入45mL無菌水中,混勻成1:10稀釋的菌懸液,這樣依次稀釋,分別得到1:1×102,1:1×103,1:1×104,1:1×105等濃度(每個稀釋度必須更換無菌吸管)。
    加樣:用0.5mL無菌吸管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1mL,加至直徑為9cm的選擇培養基表面,用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻地涂于瓊脂表面,或取1mL不同稀釋度菌懸液加入培養皿內,與瓊脂培養基混勻,每個樣品取3個連續適宜稀釋度,每一稀釋度重復3次,同時加無菌水的空白對照。
    培養:加樣后將平板用無菌紙包好,放入28℃培養38h。
    菌落計數:根據所檢測樣品的有關技術資料,通過染色、鏡檢等技術確認有效菌的菌落形態、染色反應和個體形態后,分別統計有效菌數目和雜菌數目。當空白對照平皿出現菌落數大于4時,檢測結果無效,須重做。 每個稀釋度取5~10個菌落的菌體,涂片染色(見附錄A、附錄B),顯微鏡觀察識別后,選一個適宜稀釋度(菌落在30~300個之間的平板),計算出同一稀釋度三個平皿上菌落平均數。
    有效活菌數按式(4)計算:
    有效活菌數(個/g)=菌落平均數×稀釋倍數×母液菌懸液的體積/菌劑克數或毫升數/加樣量 …………………(4)
     雜菌數是指在選擇培養基上,除有效活菌外的其他種菌的菌落數與馬丁培養基上霉菌數之和。
    7.2.6.2 霉菌數測定
    將10-2或10-3稀釋度菌液0.1mL加到馬丁培養基,操作步驟同樣品有效活菌數檢測操作。
    雜菌率(%)=雜菌數/(有效菌數+雜菌數)×100 …………………(5)
    7.2.7有效期檢驗
    在產品說明書標明的有效期到達前10d測定成品各項指標,方法同7.2.1~7.2.6。
    8 檢驗規則
    8.1 檢驗分類
    8.1.1 產品出廠檢驗 產品交貨時進行的檢驗。
    8.1.2 產品型式檢驗 新產品鑒定或國家質檢機構質量監督檢驗。
    8.2 檢驗項目 型式檢驗的檢驗項目按5.2要求進行。出廠檢驗不檢有效期。
    8.3 判定規則
    8.3.1 合格產品: a) 檢驗結果符合5.2所規定的技術指標的產品為合格產品; b) 產品有效活菌數符合指標,雜菌率不符合指標,但小于本標準規定的兩倍時,而且在馬丁培養基平板上霉菌數小于30×10-5,其他指標有一項不符合,也可判為合格產品; c) 產品有效活菌數及雜菌率符合指標,在水分、外觀、pH值、細度等次要檢測項目中,有兩項不符合技術指標,也判為合格產品。
    8.3.2 不合格產品: a)  產品有效活菌數不符合技術指標或投入菌種沒有完全相應的檢驗出,判為不合格產品; b)   產品雜菌率超過本標準規定的兩倍,判為不合格品; c)   在10-6馬丁培養基平板上霉菌數,判為不合格產品; d)   產品水分、pH值、細度、外觀等次要檢測項目中,有3項不符合技術指標,判為不合格產品。
    8.3.4 本標準中質量指標合格判斷,采用GB/T 1250中修約值比較。
    9 包裝、標識、運輸和貯存
    9.1 包裝
    9.1.1 內包裝 液體肥料小包裝
 

 

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